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GST Tag Immunoprecipitation Kit

GST Tag Immunoprecipitation Kit

产品编号 C0121
Targetmol 的 GST Tag 免疫沉淀磁珠可特异性地与带有 GST 标签的蛋白结合,可以用于蛋白质、蛋白质复合物、蛋白质核酸复合物和其他抗原的免疫沉淀(IP)。免疫沉淀磁珠试剂盒配有经过优化的预制缓冲液,为免疫沉淀实验提供了最佳的反应条件,增强了实验的稳定性。本品适用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等来源的抗原样品。
规格价格库存数量
40 T¥ 3,260期货
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实验操作小课堂
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TargetMol 的所有产品和服务仅用于科学研究,不能被用于人体,我们也不向个人提供产品和服务。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

产品编号 产品名称 产品包装
C0121B GST Tag Immunomagnetic Beads 1 mL
C0124 Immunomagnetic Beads Cell Lysis Buffer 20 mL
C0125 Immunomagnetic Beads Washing Buffer (10×) 20 mL
C0126 Immunomagnetic Beads Elution Buffer 4 mL
C0127 Immunomagnetic Beads Neutralization Buffer 2 mL

GST Tag免疫沉淀磁珠 特性
基质 硅基磁珠
粒径 200 nm
磁珠浓度 10 mg/mL
结合能力 ≥ 0.6 mg GST 标签蛋白/mL 磁珠
配体 鼠源抗GST单克隆抗体
应用推荐 IP, Co-IP

Handling Instruction | TargetMol 产品特点

  • 非特异性吸附低
  • 高效率、高产量、低消耗
  • 操作灵活、简便
  • 实验结果可靠、重复性高

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

1. 细胞裂解液制备
使用Cell Lysis Buffer处理细胞样品,按照标准步骤制备细胞裂解液,置于冰上备用,或于-20℃长期保存。

2. 磁珠预处理
1)将免疫沉淀磁珠用漩涡振荡器振荡1 min,使磁珠重新悬浮,取25 µL磁珠悬液放入1.5 mL EP管中。
2)用蒸馏水将Washing Buffer (10×)稀释为1×,使用Washing Buffer (1×)进行后续实验。向EP中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤,温和翻转EP管数次,使磁珠重新悬浮。将EP管放入磁性分离器,静置1 min,进行磁性分离,吸去上清液,取下EP管。重复上述洗涤步骤2次。

3. 免疫沉淀步骤
1)向EP管中加入500 μL制备好的细胞裂解液,将EP管放在旋转混合仪上,在37℃下旋转混合30 min。如结合力较弱,可在室温下孵育1 h,或在4℃下孵育过夜。
2)孵育结束后,进行磁性分离,弃去或保存上清以供后续分析。
3)向EP管中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤。进行磁性分离,吸去上清液,取下EP管,重复洗涤磁珠3次。

4. 抗原洗脱
提供以下几种抗原洗脱方案,用户可根据后续检测的需要选择不同的洗脱方法。
1)变性洗脱法:此方法洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测。向EP管中加入100 μL SDS-PAGE Loading Buffer(自备),混合均匀,95℃加热5 min。然后进行磁性分离或者离心(室温,13000 g, 10 min),收集上清液,进行SDS-PAGE检测。
2)酸性洗脱法:向EP管中加入100 μL Acidity Elution Buffer,置于旋转混合仪上在37℃孵育5-10 min。然后进行磁性分离或者离心,收集上清液。如需中和酸性洗脱液,可向100 μL洗脱液中加入50 μL Neutralization Buffer,调整pH至中性。

Handling Instruction | TargetMol 保存条件

  • C0124:-20℃,2年。
  • 其余试剂:4℃,2年。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

  1. 避免冷冻磁珠。磁珠应保存在储存溶液中,防止干燥。
  2. 为了减少磁珠的损失,每次磁性分离的时间不应少于1 min。
  3. 在从磁珠保存管中取出磁珠之前,应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
  4. 建议使用质量较好的移液器吸头和反应管,以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
  5. 操作者可根据实际需求,利用抗体结合反应步骤和抗原结合反应步骤中收集的上清液,检测抗体、抗原与磁珠的结合情况。
  6. 在IP实验中,不同类型的抗体和抗原结合的亲和力会有所不同。如果使用本试剂盒提供的缓冲体系未能获得理想的实验结果,操作者可以自行筛选和配制缓冲液进行实验。
  7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
  8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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