Butein (2’,3,4,4’-tetrahydroxy Chalcone), a plant polyphenol, is isolated from Rhus verniciflua. It can inhibit the activation of protein tyrosine kinase, NF-κB and STAT3, and also can inhibit EGFR.

EGF:65 μM, p60c-src:65 μM

Butein抑制HepG2细胞中表皮生长因子(EGF)受体自磷酸化水平和EGF受体以及p60c-src的酪氨酸特异性蛋白激酶活性，IC50为65μM。抑制作用对ATP是竞争性的，对磷酸受体，多聚(Glu, Ala, Tyr) 6:3:1的EGF受体酪氨酸激酶是非竞争性的。与此相反，Butein对丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶如PKC或PKA的活性几乎无显著抑制作用。Butein通过直接抑制IκBα激酶β在半胱氨酸179残基上的活性，抑制核因子(NF)-κB和NF-κB调控的基因表达。Butein(10μM)抑制超过90%的iNOS和COX-2表达，以及在LPS刺激的RAW 264.7细胞中的一氧化氮和TNF-α产生。通过抑制抑制因子-κB的降解和Erk1/2 MAP激酶的磷酸化，以及增加骨桥蛋白a vb3整合素受体的结合，Butein(10μM)抑制LPS诱导的NF-κB DNA结合活性。Butein(20μM)处理导致膀胱癌细胞BLS(M)从伸长形态变为圆形上皮样细胞，伴随着vimentin的下调和E-cadherin的上调，表明逆转了类间充质样表型。Butein(20μM)通过ERK1/2和NF-κB信号通路，抑制BLS(M)细胞的移动性和侵袭能力，逆转了TNF-α诱导的EMT样表型。

Butein（2 mg/kg）与玉米油处理的对照组相比，显著抑制肝细胞肿瘤生长。在初始治疗后第22天进行的尸检中，Butein处理组的肿瘤生长减少了2倍以上（平均相对肿瘤负担量为3.90）与对照组（8.46）相比，与此相关的是在HCC肿瘤组织中p-STAT3（9%对81%的载体组）、Bcl-2水平（26%对96%的载体组）的降低，以及caspase-3水平的增加（98%对21%的载体组）。[5] Butein显示出抗纤维化活性。Butein（25 mg/kg/天）将CCl4诱导的大鼠血清AST和ALT激活降至对照水平的35%和69%，分别将肝脏羟脯氨酸含量和TBAR4浓度降低至54%和54%。与相应的CCl4处理对照组相比，Butein处理的大鼠α1(I)胶原和TIMP-1表达分别为28%和20.3%。[7]

The cells (5× 103/mL) are incubated in triplicate in a 96-well plate in the presence or absence of indicated concentration of Butein in a final volume of 0.2 mL for different time intervals at 37 ℃. Thereafter, 20 μL MTT solution (5 mg/mL in PBS) is added to each well. After a 2-hour incubation at 37 ℃, 0.1 mL lysis buffer (20% SDS, 50% dimethylformamide) is added, incubation is continued overnight at 37 ℃, and then the optical density at 570 nm is measured by plate reader. (Only for Reference)