Defactinib (VS-6063) is a second-generation inhibitor of FAK that inhibits FAK phosphorylation at the Tyr397 site. Defactinib has potential antitumor activity.

方法: 甲状腺癌症细胞系 TT、K1、BCPAP 和 TPC1 用 Defactinib (1-50 µM) 处理 24 h，使用 MTS assay 检测细胞活力。
结果: Defactinib 在 TT、K1、BCPAP 和 TPC1 细胞系中以剂量依赖性方式降低细胞活力，IC50 分别为1.98 µM、10.34 µM、23.04 µM 和 >50 µM。[1]
方法: Taxane 敏感细胞系 HeyA8 和 Taxane 抗性细胞系 HeyA8-MDR 用 Defactinib (0.001-10 mM) 处理 1-48 h，使用 Western Blot 检测靶点蛋白表达水平。
结果: Defactinib 以剂量依赖性的方式统计学显著抑制 pFAK (Tyr397) 的表达。Defactinib 在 3 h 内抑制 pFAK (Tyr397) 的表达，并在 48 h 内逐渐恢复表达。[2]

方法: 为检测体内抗肿瘤活性，将 Defactinib (25 mg/kg，口服给药，每天两次) 和 PTX (2 mg/kg，腹腔注射，每周一次) 给药给携带 SKOV3ip1、SKOV3-TR、HeyA8 或 HeyA8-MDR 异种移植物的无胸腺裸鼠，持续 35 或 28 天。
结果: 在 HeyA8 模型中，PTX 单药治疗使肿瘤重量减轻 87.4%，联合治疗使肿瘤体重减轻幅度最大，与 PTX 相比减轻了 97.9%。在 SKOV3ip1 模型中，与 PTX 相比，联合用药组的肿瘤重量减轻了 92.7%。HeyA8 MDR 模型和 SKOV3-TR模型种单独使用 PTX 治疗无效，但Defactinib 治疗使肿瘤重量分别减少 42.6% 和 67.1%，联合用药导致中肿瘤生长的更大减少。[2]

Cell-free Kinase Activity Assays: IC50 values for TG101348 are determined commercially using the InVitrogen kinase profiling service for a 223 kinase screen that included JAK2 and JAK2V617F or Carna Biosciences for the screen of all Janus kinase family members including JAK1 and Tyk2. ATP concentration is set to approximately the Km value for each kinase.

Ovarian cancer cells are treated with increasing concentrations of VS-6063 for 96 hours and then subjected to the MTT assay. Results are confirmed with triplicate experiments.(Only for Reference)